核酸染料是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的試劑，其中溴化乙錠(EtBr)因其高靈敏度，長(zhǎng)期以來(lái)一直被用作核酸染色的標(biāo)準(zhǔn)染料。但是EtBr具有潛在的誘變和致癌作用，EtBr能與DNA嵌合，引起細(xì)胞突變，長(zhǎng)期接觸可能對(duì)人體健康產(chǎn)生負(fù)面影響。NIPPON GENETICS推出的新型MIDORIGreen系列核酸染料，是一種非致癌性和非致突變性的染料，無(wú)法穿透乳膠手套和細(xì)胞膜。同時(shí)致突變性試驗(yàn)（Ames試驗(yàn)）和細(xì)胞毒性試驗(yàn)均為陰性，因此是一種高安全度的核酸染料[1]。

紫外光與EtBr染色至今仍一起被用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中檢測(cè)核酸。然而紫外光譜會(huì)導(dǎo)致DNA樣品的修飾和降解，30秒的紫外線曝光足以大幅降低克隆效率。藍(lán)/綠LED在470 nm - 520 nm處發(fā)出安全可見(jiàn)光，這種光譜對(duì) DNA 沒(méi)有破壞性，與紫外光相比，DNA完整性和克隆/測(cè)序效率完全不受影響，即使在長(zhǎng)時(shí)間的光照下也是如此。MIDORIGreen系列核酸染料經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可在紫外光或藍(lán)/綠光激發(fā)時(shí)獲得更亮的信號(hào)，同時(shí)也兼容紫外光。

圖1：EtBr和MIDORIGreen吸收光譜對(duì)比

MIDORIGreen產(chǎn)品特點(diǎn)

?      出色的信號(hào)質(zhì)量

?      用于凝膠內(nèi)染色和后染色的安全核酸染料

?      溴化乙錠的安全替代品：非致癌無(wú)毒

?      適用dsDNA、ssDNA或RNA染色

?      膠染法和泡染法均可

MIDORIGreen Advance

MIDORIGreen Advance靈敏度與EtBr相當(dāng)，可以直接添加到熔融的瓊脂糖中。同時(shí)兼容紫外線或藍(lán)/綠LED，因此無(wú)需更改原有的實(shí)驗(yàn)步驟。MIDORIGreen Advance的稀釋倍數(shù)可高達(dá)1：25000。100 mL瓊脂糖凝膠只需4μL至6μL，每1mL的染料可配置約17L至25L瓊脂糖凝膠。

MIDORIGreen Direct

MIDORIGreen Direct中已經(jīng)包含10X Loading Buffer，可以直接添加到核酸樣品中，無(wú)需將其或任何其他染料添加到凝膠基質(zhì)。相較于在凝膠中添加染料的染色方式，核酸的直接染色消除了背景染色，提供了完美的信噪比。1 mL的 MIDORIGreen Direct足夠提供1,000至2,000個(gè)樣品的染色。

MIDORIGreen Direct可以為下游提供更好的結(jié)果。

從瓊脂糖凝膠中分離核酸可以進(jìn)一步下游應(yīng)用，許多染料，如EtBr甚至SYBR? Green，由于其嵌入特性，都是強(qiáng)酶抑制劑。而MIDORI Green 染料與 DNA 骨架結(jié)合的方式能為下游應(yīng)用帶來(lái)更高的效率，包括克隆、測(cè)序、PCR等。[2]

MIDORIGreen Xtra

MIDORIGreen Xtra是NIPPON GENETIC最新一代核酸染料，針對(duì)藍(lán)/綠LED和藍(lán)LED光源進(jìn)行了優(yōu)化，可以在瓊脂糖凝膠中產(chǎn)生強(qiáng)熒光信號(hào)。同時(shí)MIDORIGreen Xtra不會(huì)對(duì)瓊脂糖凝膠進(jìn)行染色，因而具有很低的背景噪音，從而獲得出色的信噪比。由于非常低的背景熒光，這使得識(shí)別少量 DNA 變得非常容易，因此MIDORIGreen Xtra具有超高靈敏度。

圖3：使用MIDORI Green Xtra檢測(cè)的DNA條帶具有超高靈敏度（注：左圖使用藍(lán)色/綠色 LED 透射儀進(jìn)行檢測(cè)；右圖使用藍(lán)色LED透射儀進(jìn)行檢測(cè)。）

MIDORIGreen easy

MIDORIGreen easy具有與MIDORIGreen Xtra相同的出色信號(hào)質(zhì)量和低背景，擁有比EtBr更好的信號(hào)，MIDORIGreen easy的開(kāi)發(fā)是為了可以輕松替換SYBR®safe，同時(shí)染色方案不需要改變。MIDORIGreen Easy的稀釋倍數(shù)可高達(dá)1：10000，100 mL瓊脂糖凝膠只需8μL至10μL。

圖4：MIDORIGreen easy（左）與MIDORIGreen Xtra（右）使用藍(lán)/綠 LED 激發(fā)燈。

MIDORIGreen系列檢測(cè)光譜與靈敏度

注: √表示兼容；?表示兼容但不推薦；

MIDORIGreen核酸染料系列產(chǎn)品列表

NIPPON Genetics是一家專注于分子和細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的尖端產(chǎn)品的公司，已通過(guò)DIN EN ISO 9001：2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證。北京西美杰科技有限公司是NIPPON Genetics中國(guó)區(qū)代理，如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣，歡迎致電北京西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.oxykgb.cn了解更多產(chǎn)品信息。